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GFP和YFP激发光和发射光波长

作者:上海峰志仪器 时间:2020-05-20 19:59:05浏览11811 次

信息摘要:

GFP在蓝光或紫外光激发下发出绿色荧光。绿色荧光蛋白基因是目前应用的报告基因之一,检测方便,只需激发光源,不需任何底物或辅助因子;材料可活体观测,无需预处理;植物本身无绿色荧光,不会有假阳性。因此,它目前在动物、植物、微生物的研究中已得到广泛的应用。

 上海峰志仪器有限公司现货供应便携式荧光蛋白激发光源,能够观察GFP、YFP、RFP在种子、愈伤、叶片、根系以及老鼠、斑马鱼上的表达。

绿色荧光蛋白(GreenFluorescent Protein,简称GFP)是在美国西北海岸所盛产的一种名为Aequorea victoria的水母中发现的一种可以发出绿色荧光的蛋白质。GFPzui早是在1962年由日本科学家下村修发现,是由238氨基酸组成的单体蛋白质,蛋白分子量约为27kD。GFP的晶体结构显示,蛋白质中央是一个圆柱形水桶样结构,长420nm,宽240nm,由11个围绕中心α螺旋的反平行β折叠组成,桶的顶部由3个短的垂直片段覆盖,底部由一个短的垂直片段覆盖,对荧光活性很重要的生色团则位于桶的大空腔内。实验表明GFP荧光产生的前提是桶状结构完整性,去除N端6个氨基酸或C端9个氨基酸,GFP均会失去荧光。原因是GFP生色团的形成效率较低,而且形成过程受外界环境影响较大。

GFP主要使用什么波段的激发光?你观察到得荧光是什么颜色?

GFP在蓝光或紫外光激发下发出绿色荧光。绿色荧光蛋白基因是目前应用的报告基因之一,检测方便,只需激发光源,不需任何底物或辅助因子;材料可活体观测,无需预处理;植物本身无绿色荧光,不会有假阳性。因此,它目前在动物、植物、微生物的研究中已得到广泛的应用。

植物病毒表达载体(GFP或eGFP,RFP),农杆菌侵染植株后,如果要观察GFP发光,需要选用LUYOR-3415RG激发光源来照射植物,同时需要佩戴美国路阳专用的荧光观察眼镜,即可观察到明亮的GFP荧光。LUYOR-3415RG的双波段光源能够激发GFP,eGFP和RFP,无论是绿色荧光蛋白还是增强型绿色荧光蛋白以及红色荧光蛋白,LUYOR-3415RG均能够激发出明亮的荧光,如果需要拍照,需要选用路阳专用遮光片才可以拍到荧光。路阳中国地区免费咨询电话:4006-254-365.也可免费申请样机试用。

GFP和YFP激发光和发射光波长

GFP变体的激发和发射数据

GFP VariantExcitation max (nm)Emission max (nm)
wtGFP395509
GFPuV395509
Stemmer395509
EGFP488509
GFP-S65T489509
Y66H382459
EBFP380460

YFP激发波长和发射波长

黄色荧光蛋白(Yellow Fluorescent Protein ,YFP)可以看做绿色荧光蛋白的一种突变体,来源于维多利亚多管水母( Aequorea victoria)。相对于绿色荧光蛋白,其荧光向红色光谱偏移,而这主要是由于蛋白203位苏氨酸变为酪氨酸。其更大激发波长为514 nm,更大发射波长为527 nm。excitation wavelength and the emission wavelength for yfp.

Yellow  Fluorescent Proteins Excitation Emission

如何能观测YFP黄色荧光蛋白的表达?

美国路阳生产有多款便携式激发光源,无需荧光显微镜就能轻松观察筛选黄色荧光蛋白表达阳性。LUYOR-3260CY便携式YFP激发光源能直接分选YFP表达阳性的植株,能够分选愈伤组织、植株、种子、菌落等。如欲进一步了解便携式荧光蛋白激发光源,可直接联系上海峰志仪器有限公司的销售客服

黄色荧光蛋白(YFP)在线虫上的表达

上图为黄色荧光蛋白(YFP)在线虫上的表达(体视显微镜荧光适配器下观察效果)

GFP在烟草叶片的表达

上图为GFP在烟草叶片的表达(LUYOR-3415RG激发光源照射下观察的效果)

Yellow Fluorescent Proteins/常用黄色荧光蛋白的激发波长和发射波长


YFP种类 Excitation 激发光波长(nm) Emission发射光波长(nm)
EYFP514527
Topaz514527
Venus515528
mCitrine516529
YPet517530
TagYFP508524
PhiYFP525537
ZsYellow1529539
mBanana540553

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