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LUYOR-3415RG用于大豆根系转化的检测

作者:上海峰志 时间:2021-04-20 09:11:24浏览105 次

信息摘要:

近日,华中农业大学在《new phytologist》期刊发表了文献《The miR156b-GmSPL9d module modulates nodulation by targeting multiple core nodulation genes in soybean》,作者使用了美国路阳生产的便携式双波长荧光蛋白激发光源用于检测大豆毛根的转化。LUYOR-3415RG便携式荧光激发光源能够检测动植物体内的荧光蛋白的表达。无需荧光显微镜,通过荧光观察眼镜就能直接观察荧光蛋白的表达。

LUYOR-3415RG用于大豆根系转化的检测

近日,华中农业大学在《new phytologist》期刊发表了文献《The miR156b-GmSPL9d module modulates nodulation by targeting multiple core nodulation genes in soybean》,作者使用了美国路阳生产的便携式双波长荧光蛋白激发光源用于检测大豆毛根的转化。LUYOR-3415RG便携式荧光激发光源能够检测动植物体内的荧光蛋白的表达。无需荧光显微镜,通过荧光观察眼镜就能直接观察荧光蛋白的表达。以下是文献摘要,具体文献全文链接在本文末尾。

大豆是蛋白质的zui佳来源之一,是人类和动物饮食的主食。由于大豆富含蛋白质,因此在发育和繁殖过程中,它对氮(N)的需求比其他作物高得多。大豆与土壤中固氮细菌建立了共生关系,这些细菌能够转化大气中的二氮(N2)转化为氨,这有助于满足其高氮需求。作为交换,大豆植物为这些细菌提供碳水化合物和其他营养物质,以促进根瘤菌的生长和增殖。共生固氮不仅有利于提高大豆的产量,而且是增加耕地氮供应以提高其他谷类作物产量的有力手段。因此,共生固氮是与大豆作物产量和质量以及一般可持续农业相关的主要因素。

LUYOR-3415RG用于大豆根系转化的检测

共生氮固定发生在大豆的指定根器官(例如根结节)中,该根瘤以根瘤菌为宿主。当土壤中的氮含量低时,大豆释放异黄酮(例如染料木黄酮)以诱导根瘤菌产生点缀因子(NFs)。NF被大豆NF受体(NFR1和NFR5)感知并触发调节根瘤感染和结节器官发生的信号级联反应,其由一系列发育过程组成,包括根外皮质细胞的去分化,结节原始形成,结节出现和结节成熟。已经表明,根瘤菌感染和结节器官发生的发作是由结节信号通路介导的,在过去三十年中已经确定了许多关键成分。其中,结节起始(NIN),一种RWP-RK转录因子和早期结节蛋白基因(例如ENOD40),是zui早确定的豆类结节所必需的调节因子,包括大豆。

LUYOR-3415RG用于大豆毛根转化和重氮化芽孢杆菌接种

根据前面描述的方法,使用根瘤菌K599进行大豆毛根转化以生成复合植物)。对于根瘤菌接种,将转基因复合植物移植到含有蛭石的花盆(10×10厘米)中,用Y. Wang等人描述的N-缺乏溶液灌溉。(2009). 植物生长了1周的恢复期(16小时的光照,25°C和50%的相对湿度)。然后将植物接种在新制备的双氮二元组菌株USDA110(OD)悬浮液中。600= 0.08)。接种后28 d,对每个毛根或每个根系的结核数进行评分,并在PBS(pH 7.5)中对根或结节进行短暂冲洗,立即在液氮中冷冻并储存在-80°C下进行基因表达分析。对于miR156b/f-CRISPR/Cas9复合植株的表型分析,我们首先计算了复合植株每个毛根的结节数,然后提取DNA检测出可选择的标记条基因。通过Sanger测序验证了推定的转基因根系。对于GmSPL9d-CRISPR / Cas9根的表型分析,我们使用便携式荧光手电筒鉴定了转基因毛茸茸的根(LUYOR-3415RG,上海,中国)。检查了每个转基因根的结节数量,并通过Sanger测序证实了转基因根系的突变。

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详细介绍:便携式荧光蛋白激发光源LUYOR-3415RG

文献地址https://doi.org/10.1111/nph.17899   

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