GFP和YFP有什么区别

GFP和YFP有什么区别

GFP 和 YFP 之间的主要区别在于， GFP 在暴露于从蓝色到紫外线的光时呈现绿色，而 YFP 在暴露于相同的光时呈现黄色。此外，GFP zui初来源于水母Aequorea Victoria，而 YFP 是 GFP 蛋白的基因突变体。

GFP（绿色荧光蛋白）和YFP（黄色荧光蛋白）是两种类型的荧光蛋白，它们在暴露于从蓝色到紫外线范围的光下时呈现出不同颜色的荧光。然而，它们在分子生物学中的应用是相同的。

什么是绿色荧光蛋白？

GFP（绿色荧光蛋白）是一种生物发光多肽蛋白，天然存在于水母、维多利亚水母和许多其他海洋生物中。在Aequorea Victoria，它被称为水母发光蛋白，当它暴露在从蓝色到紫外线的范围内时会发出荧光。这意味着；GFP 完全吸收蓝光 (475 nm) 或长紫外范围内的 395 nm 光并发出绿光 (509 nm)。

图 1：Aequorea Victoria

GFP 蛋白含有 238 个氨基酸，蛋白大小为 26.9 kDa。它折叠形成一个β桶的形状。在这里，使其荧光的蛋白质部分是由主链原子 Ser65、Tyr66 和 Gly67 的共轭形成的，在氧气存在下形成高度共轭的平面对羟基苯亚甲基咪唑啉酮发色团。发色团填充在 β 桶结构内，保护发色团不因顺磁氧、水偶极子或顺反异构化而猝灭。此外，发色团与相邻分子的非共价相互作用增强了其光谱特性。

图 2：GFP 结构

此外，GFP 在分子生物学中用作基因表达的报告基因，证明外源基因在宿主生物体内的表达。此外，它还可用于确定将要表达特定蛋白质的亚细胞位置。在这里，感兴趣的蛋白质与 GFP 融合，这种融合蛋白被转化到宿主中。

图 3：EGFP 表达(烟草叶片的GFP在LUYOR-3415RG激发光源照射下发出绿色荧光）

然而，野生型 GFP 的主要缺点是其有效性降低，因为在 37 °C 等生理温度下折叠效率低，从而降低了荧光信号。此外，GFP 的低成熟率允许蛋白质在细胞内聚集。增强型 GFP ( EGFP ) 是野生型 GFP 的衍生物，具有 37 °C 折叠效率 (F64L) 点突变体，由单点突变 (S65T) 产生的支架具有改进的光谱特性，包括增加的荧光、光稳定性和主激发峰移动到 488 nm，峰值发射保持在 509 nm。

YFP是什么

YFP（黄色荧光蛋白）是一种作为基因突变引入的 GFP 衍生物。实际上，它是由T203Y突变完成的颜色突变体。这导致取代的酪氨酸残基和发色团之间的 π 电子堆积相互作用。因此，YFP 吸收波长为 514 nm 的绿色光，同时发射波长为 527 nm 的黄色光。

图 4：GFP 衍生物

此外，Citrine、Venus 和 YPet 是 YFP 的三个改进版本。它们具有共同的特性，包括降低氯化物敏感性、更快成熟和增加亮度。YFP 在分子生物学中的主要重要性是作为基因编码 FRET（Förster 共振能量转移）传感器的受体。在这里，常见的供体荧光蛋白是单体青色荧光蛋白 (mCFP)，它是另一种 GFP 衍生物。

 GFP 和 YFP 之间的相似之处

GFP 和 YFP 是两种在分子生物学中具有相似应用的荧光蛋白。

两者都可以在暴露于从蓝色到紫外范围的光时发出荧光。

荧光蛋白的基因被用作基因表达的报告基因。

此外，这些蛋白质可以在多种生物体内表达，包括人类、哺乳动物、鱼类、真菌、酵母和细菌细胞。

此外，通过重组DNA技术将荧光蛋白基因导入宿主细胞。

GFP和YFP之间的区别

GFP 是指在荧光灯下发绿光的蛋白质，天然存在于水母维多利亚水母中，而 YFP 是指绿色荧光蛋白 (GFP) 的基因突变体。因此，这是 GFP 和 YFP 之间的根本区别。

GFP代表绿色荧光蛋白，而YFP代表黄色荧光蛋白。

GFP 和 YFP 之间的主要区别在于 GFP 发出绿色光，而 YFP 发出黄色光。此外，GFP 天然存在于许多海洋生物中，包括水母、维多利亚水母，而 YFP 是 GFP 的基因突变体。因此，这是 GFP 和 YFP 之间的另一个区别。

激发光的峰值：

GFP的主要激发峰在395 nm，次要激发峰在475 nm，而YFP的激发峰在514nm。

发射光：

GFP 的发射峰位于 509 nm，而 YFP 的发射峰位于 527 nm。因此，这也是 GFP 和 YFP 之间的区别。

应用

此外，GFP 和 YFP 之间的另一个重要区别是 GFP 作为表达的报告者和可视化融合蛋白的定位很重要，而 YFP 用作非侵入性细胞内 pH 生物传感器或局部 Ca 2+浓度的荧光指示剂。

结论

GFP 是一种荧光蛋白，天然存在于水母维多利亚水母中。它在分子生物学中用作表达的报告者并可视化融合蛋白的定位。通常，GFP 在暴露于蓝色至紫外光时会发出明亮的绿色荧光。相比之下，YFP 是 GFP 的基因突变体，在暴露于蓝色紫外线下时会发出黄色荧光。因此，GFP 和 YFP 之间的主要区别在于它们发出的荧光颜色及其来源。

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