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sfGFP荧光蛋白的激发光和发射光

作者:上海峰志 时间:2021-05-05 17:30:09浏览160 次

信息摘要:

sfGFP是superfolder GFP的缩写,它是一种设计精良的折叠版本的GFP,对化学变性剂和极端温度显示更大的耐受力。Superfolder GFP是2005年发表的一种基本(构成荧光)绿色荧光蛋白,来源于Aequorea victoria。据报道,它是一种非常快速成熟的弱二聚体。Superfolder GFP源自Folding Reporter GFP,

sfGFP是superfolder GFP的缩写,它是一种设计精良的折叠版本的GFP,对化学变性剂和极端温度显示更大的耐受力。Superfolder GFP是2005年发表的一种基本(构成荧光)绿色荧光蛋白,来源于Aequorea victoria。据报道,它是一种非常快速成熟的弱二聚体。Superfolder GFP源自Folding Reporter GFP,具有以下突变:S30R/Y39N/N105T/Y145F/I171V/A206V


superfolder GFP的激发光和发射光:

sfGFP的激发光是·485nm,发射光为510nm

Superfolder GFP EX:485nm,Superfolder GFP EM:510nm

sfGFP的激发光和发射光的光谱图

superfolder GFP的激发光和发射光的光谱图

eGFP和GFP的区别:

GFP(绿色荧光蛋白)是一种在蓝光或紫外光下发出绿色光的蛋白质。它天然存在于水母维多利亚水母中。GFP由238个氨基酸组成。GFP 的大小为 26.9 kDa。GFP 是分子生物学中的强大工具,因为它具有内在的荧光,没有任何辅助分子。荧光是由于蛋白质的连续氨基酸的共价重排。蛋白质折叠后,主链原子 Ser65、Tyr66 和 Gly67 在 O 2存在下形成高度共轭的平面对羟基苯亚甲基咪唑啉酮发色团. 晶体结构研究表明,发色团填充在分子的 β-桶结构的核心内可防止其因顺磁氧、水偶极子或顺反异构化而猝灭。此外,发色团与相邻分子的非共价相互作用增强了其光谱特性。

EGFP(增强型绿色荧光蛋白)是野生型 GFP 的变体,相对于 GFP 具有更高强度的发射。它是个也是重要的 GFP 变体之一。两个突变 F64L 和 S65T 在 37 °C 下产生具有更高折叠效率的 EGFP。有趣的是,由于 S65T 对 395 nm 峰的抑制,EGFP 在 ~490 nm 处具有单个激发峰,因为它调节附近 Glu222 的电离状态。另一方面,F64L 提高了 37 °C 时的折叠效率。重要的是,EGFP 的密码子序列针对在哺乳动物细胞中的表达进行了优化。

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