欢迎访问上海峰志仪器有限公司官网!
上海峰志仪器有限公司shanghai fengzhi instrument co,.ltd
全国咨询热线:13818683556
您的位置:首页>>生命科学资讯

GFP和EGFP之间的区别

作者:上海峰志 时间:2021-04-12 09:52:14浏览27273 次

信息摘要:

绿色荧光蛋白GFP和EGFP之间的主要区别在于GFP(代表绿色荧光蛋白)是一种在暴露于蓝光时表现出明亮的绿色荧光的蛋白质,而EGFP(代表增强型绿色荧光蛋白)表现出比GFP更强的荧光。 此外,GFP和EGFP之间的另一个重要区别是GFP是从水母Aequorea victoria分离出来的野生型蛋白质。但是,EGFP是原始野生型的工程变体。

GFP和EGFP之间的区别

绿色荧光蛋白GFP和EGFP之间的主要区别在于GFP(代表绿色荧光蛋白)是一种在暴露于蓝光时表现出明亮的绿色荧光的蛋白质,而EGFP(代表增强型绿色荧光蛋白)表现出比GFP更强的荧光。 此外,GFP和EGFP之间的另一个重要区别是GFP是从水母Aequorea victoria分离出来的野生型蛋白质。但是,EGFP是原始野生型的工程变体。GFP和EGFP是两种类型的蛋白质,用作内部发色团。它们不需要任何辅助酶/底物,辅因子或基因产物来展示其颜色。因此,两者都被用作分子生物学中基因表达的报告者。

什么是 GFP?

GFP(绿色荧光蛋白)是一种在蓝光或紫外线下发出绿色光的蛋白质。它自然发生在水母,维多利亚水母中。GFP由238个氨基酸组成。GFP的尺寸为26.9 kDa。GFP是分子生物学中的强大工具,因为它具有固有的荧光,没有任何辅助分子。荧光是因为蛋白质的连续氨基酸的共价重排。蛋白质折叠后,主链原子Ser65,Tyr66和Gly67在O的存在下形成高度共轭的平面对羟基苄基亚胺唑啉酮发色团2.晶体结构研究表明,发色团在分子β桶结构核心内的堆积可以保护其免受顺磁性氧,水偶极子或顺式异构化的淬火。此外,发色团与邻近分子的非共价相互作用增强了其光谱性质。

GFP和荧光团的带状表示

图1:GFP和荧光团的带状表示

GFP可以在转基因修饰期间引入生物体中。它也可以世代相传。野生型GFP的主要缺点是由于在37°C等生理温度下低效折叠,导致蛋白质在细胞成像中的有效性降低,从而降低了荧光信号。此外,宿主细胞内GFP的成熟速率缓慢,同时趋于聚集。由于存在两种不同形式的发色团,可以观察到两个激发峰。然而,蛋白质工程通过引入野生型GFP的变体形式解决了大多数问题。

什么是EGFP

EGFP(增强型绿色荧光蛋白)是野生型GFP的变体,相对于GFP具有更高的发射强度。它是较早也是重要的GFP变体之一。F64L和S65T这两个突变在37°C下产生具有更大折叠效率的EGFP。 有趣的是,EGFP在~490nm处具有单个激发峰,因为S65T抑制了395 nm峰,因为它调制了附近Glu222的电离状态。另一方面,F64L提高了37°C时的折叠效率。 重要的是,EGFP的密码子序列针对哺乳动物细胞中的表达进行了优化。

EGFP 表达

图 2:EGFP 表达(烟草叶片的GFP在LUYOR-3415RG照射下发出绿色荧光)

GFP和EGFP之间的相似之处

GFP和EGFP是当暴露于蓝光时表现出亮绿色荧光的蛋白质。

两者都可以作为内部发色团,无需辅助酶/底物,辅因子或基因产物来展示其颜色。

它们与发色团形成经典的β桶褶皱,包含穿过结构核心的螺旋。

它们被用作分子生物学中表达的报告者。

GFP和EGFP之间的区别

GFP:一种野生型蛋白质,在蓝光或紫外线下呈现绿色荧光,自然存在于水母中,维多利亚水母

EGFP:野生型GFP的变体,相对于GFP具有更高的强度发射

GFP:绿色荧光蛋白

EGFP:增强型绿色荧光蛋白

GFP: 野生型

EGFP:突变体

激励峰的区别:

GFP:两个峰值(395 nm 和 490 nm,推荐使用LUYOR-3280UV或3280RB观察GFP表达

为GFP的激发和发射光谱图

上图为GFP的激发和发射光谱图

EGFP:单峰 (490 nm,推荐使用LUYOR-3280RB观察EGFP表达

EGFP的激发和发射光谱图

上图为EGFP的激发和发射光谱图

结论

GFP是野生型蛋白质,当暴露于蓝光或紫外光时,会表现出明亮的绿色荧光。EGFP是GFP的一种变体,与GFP相比,它表现出更高强度的荧光。因此,GFP和EGFP之间的主要区别在于每种蛋白质发出的绿色荧光的强度。

上海峰志仪器有限公司销售美国路阳便携式荧光蛋白激发光源荧光手电筒,能够激发各种荧光蛋白在动植物上的转基因表达,如果您要观察GFP荧光蛋白在植物叶片、愈伤、种子、根系的转基因表达,您可浏览《便携式荧光蛋白激发光源LUYOR-3415RG 》和《荧光手电筒LUYOR-3280RB》获取相关产品信息。上海峰志提供样机免费试用,满意付款。我们还在北京、郑州、海口、武汉、哈尔滨设有代理商,可以提供上门演示。详情请按照网页底部电话或.联系。

推荐产品 / products